初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo):立克次體及檢驗(yàn)(4)
初級(jí)檢驗(yàn)技士輔導(dǎo):立克次體及檢驗(yàn)(4)$lesson$
微生物檢驗(yàn)
(一)標(biāo)本的采集和處理(熟悉)
1、病人血液標(biāo)本:發(fā)熱初期或急性期交易檢出病原體。在病程第1周內(nèi)并在用抗生素前采血,立即床側(cè)接種。
血清學(xué)檢查一般采集3份血液標(biāo)本,分別取自病程早期、病后10-14天及病后21-28天。如患者已使用抗生素治療,因抗體產(chǎn)生較晚,需采集4份標(biāo)本。
2、活檢或尸體材料:肺、肝、脾等組織標(biāo)本研磨制成懸液,離心取上清液接種,有細(xì)菌污染時(shí)加青霉素置室溫作用30分鐘后街終于動(dòng)物。
(二)標(biāo)本直接檢查(熟悉)
1、立克次體的染色法:多用于臟器標(biāo)本的檢查。固定后用熒光抗體染色或常規(guī)染色鏡檢。必要時(shí)做切片檢查,標(biāo)本片薄而均勻,組織結(jié)構(gòu)清晰,常見(jiàn)脾、肺及心瓣膜中有立克次體,也可在肝、腎及皮疹活檢組織中檢出。
2、核酸檢測(cè):針對(duì)特異性抗原基因的序列設(shè)計(jì)引物,采用PCR技術(shù)和核酸探針檢測(cè)。
(三)立克次體培養(yǎng)法(熟悉)
1、立克次體分離:班疹傷寒、斑點(diǎn)熱、恙蟲(chóng)病和Q熱病原體分離多用動(dòng)物接種。常用動(dòng)物有豚鼠、金黃地鼠、小白鼠、大白鼠及家兔等。漢賽巴通體用人工培養(yǎng)基,埃立克體用細(xì)胞培養(yǎng)。
2、分離株的大量繁殖及保存用雞胚卵黃囊培養(yǎng)或細(xì)胞培養(yǎng)。
(四)血清學(xué)試驗(yàn)(掌握)
血清學(xué)試驗(yàn)是研究立克次體的重要方法,也是立克次體病實(shí)驗(yàn)診斷和鑒定病原體的重要手段。患者雙份血清的試驗(yàn)結(jié)果,有利于立克次體病現(xiàn)癥診斷。
1、間接免疫熒光試驗(yàn)、ELISA間接法:是目前檢測(cè)標(biāo)本中特異性抗體的常用方法。
單份血清滴度≥1:128者有現(xiàn)癥診斷意義,一般滴度在1:16或以上即為陽(yáng)性,4倍增長(zhǎng)可作為立克次體病的現(xiàn)癥診斷。
補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)雖特異,但敏感性不如間接免疫熒光和ELISA,且操作繁瑣,除Q熱診斷外,多被前兩者取代。
2、凝集試驗(yàn):分為特異性凝集和非特異性凝集試驗(yàn)兩種。
(1)特異性凝集試驗(yàn):微量凝集(MA)試驗(yàn)、間接血凝(IHA)、膠乳凝集(LA)試驗(yàn)
MA以血清最高稀釋度呈凝集者為其滴度,達(dá)1:8以上者為陽(yáng)性。IHA滴度在1:50以上有診斷價(jià)值。LA結(jié)果與IHA結(jié)果相吻合。
(2)非特異性凝集試驗(yàn):
外斐試驗(yàn)常用于立克次體屬的三個(gè)生物型的診斷,缺乏敏感性和特異性。本試驗(yàn)除Q熱、立克次體痘及漢賽巴通體感染為陰性外,其他為陽(yáng)性結(jié)果。
一般血清滴度達(dá)1:160即為陽(yáng)性,病程中雙份或多份血清試驗(yàn),至少效價(jià)有4倍增長(zhǎng)才有診斷意義。
- 2012年檢驗(yàn)職稱考試報(bào)名時(shí)間預(yù)測(cè)
- 2011檢驗(yàn)職稱考試成績(jī)查詢?nèi)肟?/FONT>
- 檢驗(yàn)職稱考試百套試題在線測(cè)試
- 2010衛(wèi)生職稱考試通過(guò)率再創(chuàng)新高