2012年中藥士輔導(dǎo)：三萜類化合物色譜分離方法

　　色譜法是目前分離三萜類化合物最常用的方法，通常采用多種色譜法相組合的方法。$lesson$

　　①吸附柱色譜法;②分配柱色譜法;③高效液相色譜法;④大孔樹脂柱色譜;⑤凝膠色譜法。

　　(1)吸附柱色譜法：

　?、俪Ｓ梅椒ǎ捎糜诜蛛x各類三萜化合物。

　　②依據(jù)所用的吸附劑性質(zhì)的不同，分為正相吸附柱色譜和反相吸附柱色譜。

　　③正相吸附柱色譜的吸附劑常用硅膠。

　　④反相柱色譜通常以鍵合相硅膠Rp-18、Rp-8或Rp-2等為填充劑。

　　(2)分配柱色譜法：多用于分離皂苷，常用硅膠等作為支持劑，固定相為3%草酸水溶液等，流動(dòng)相為含水的混合有機(jī)溶劑：如氯仿-甲醇-水，正丁醇-水等。

　　(3)高效液相色譜法：是目前分離皂苷類化合物最常用的方法，分離效能較高。用于皂苷的分離制備一般采用反相色譜柱，以甲醇-水、乙腈-水等系統(tǒng)為洗脫劑。

　　(4)大孔樹脂柱色譜：適用于皂苷的精制和初步分離。

　　操作：將含有皂苷的水溶液通過大孔樹脂柱后，先用水洗滌除去糖和其他水溶性雜質(zhì)，然后再用濃度由低到高的甲醇或乙醇依次進(jìn)行梯度洗脫，極性大的皂苷可被l0%～30%的醇洗脫下來，極性小的皂苷則被50%以上的醇洗脫下來。

　　(5)凝膠色譜法：分子篩的原理來分離分子量不同的化合物，在用不同濃度的甲醇、乙醇或水等溶劑洗脫時(shí)，各成分按分子量遞減順序依次被洗脫下來。即分子量大的皂苷先被洗脫下來，分子量小的皂苷后被洗脫下來。應(yīng)用較多的是在有機(jī)相中使用的Sephadex LH-20.

2012年衛(wèi)生資格考試大綱匯總