2012年初級檢驗技士免疫檢驗：速率散射比濁分析簡介

　　(一)基本原理

　　速率散射比濁分析是一種動力學(xué)測定方法，在一定條件下，抗原和相應(yīng)的抗體很快結(jié)合成抗原抗體免疫復(fù)合物顆粒，速率比濁法就是在一定時間內(nèi)抗原抗體結(jié)合過程中，測定二者結(jié)合的最大反應(yīng)速度，即反應(yīng)達頂峰峰值。所謂速率是抗原抗體結(jié)合反應(yīng)過程中，在單位時間內(nèi)兩者結(jié)合的速度。速率法是測定最大反應(yīng)速率，即在抗原抗體反應(yīng)達最高峰時，通常為數(shù)十秒鐘，測定其復(fù)合物形成的量。峰值的高低在抗體過量情況下與抗原的量成正比。峰值出現(xiàn)的時間與抗體的濃度及其親和力直接相關(guān)。不同抗原含量其速率峰值不同，通過電腦處理，求出抗原含量。

　　(二)抗原過量檢測

　　真正的抗原過量檢測是為保證速率散射比濁分析檢測的準(zhǔn)確性和精確度，在Beckman公司的生產(chǎn)的ARRY360系統(tǒng)中，設(shè)計有抗原過量檢測系統(tǒng)。其原理是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)形成的濁度不斷增加而設(shè)計的。在抗體固定的情況下，免疫復(fù)合物的生成量隨抗原的增加而增加，當(dāng)抗原量超過抗體量時，免疫復(fù)合物的量反而減少。根據(jù)這一原理，當(dāng)標(biāo)本中的抗原和反應(yīng)液中的抗體結(jié)合后，若反應(yīng)液中有未結(jié)合的抗體存在，再加入抗原時，可見新的速率峰值信號。如果沒有游離的抗體存在，即抗原過剩的情況下，就不會有或者只有很小的新的速率信號出現(xiàn)，儀器會重新對標(biāo)本進行更高稀釋(1:6、1:36、1:216及1:1296等)，然后進行測定，使結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

　　附：終點散射比濁法

　　其原理是讓抗原抗體作用一定時間，使其反應(yīng)達到平衡后，測定其復(fù)合物的量。復(fù)合物的濁度不再受時間的影響，但反應(yīng)復(fù)合物聚合產(chǎn)生絮狀沉淀之前(大約反應(yīng)數(shù)十分鐘)進行濁度測定。敏感度達mg/L水平，可自動化，但反應(yīng)時間較長。

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