2013年初級檢驗技士免疫檢驗：生物學檢測法檢測細胞因子

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　　生物學檢測又稱生物活性檢測，是根據細胞因子特定的生物活性而設計的檢測法。由于各種細胞因子具有不同的活性，例如IL-2促進淋巴細胞增殖，TNF殺傷腫瘤細胞，CSF刺激造血細胞集落形成，IFN保護細胞免受病毒攻擊，因此選擇某一細胞因子獨特的生物活性，即可對其進行檢測。

　　生物活性檢測法又可分為以下幾類：

　　1.細胞增殖法：許多細胞因子具有細胞生長因子活性，特別是白細胞介素，如IL-2刺激T細胞生長、IL-3刺激肥大細胞生長、IL-6刺激漿細胞生長等。利用這一特性，現已篩選出一些對特定細胞因子起反應的細胞，并建立了只依賴于某種因子的細胞系，即依賴細胞株(簡稱依賴株)。這些依賴株在通常情況下不能存活，只有在加入特定因子后才能增殖。例如IL-2依賴株CTLL-2在不含IL-2的培養(yǎng)基中很快死亡，而加入IL-2后則可在體外長期培養(yǎng)。在一定濃度范圍內，細胞增殖與IL-2量呈正比，因此通過測定細胞增殖情況(如使用3H-TdR摻入法、MTT法等)鑒定IL-2的含量。除依賴株外，還有一些短期培養(yǎng)的細胞，如胸腺細胞、骨髓細胞、促有絲分裂原刺激后的淋巴母細胞等，均可作為靶細胞來測定某種細胞因子活性。

　　2.靶細胞殺傷法：是根據某些細胞因子(如TNF)能在體外殺傷靶細胞而設計的檢測方法。通常靶細胞多選擇體外長期傳代的腫瘤細胞株，利用同位素釋放法或染料染色等方法判定細胞的殺傷率。

　　3.細胞因子誘導的產物分析法：某些細胞因子可刺激特定細胞產生生物活性物質，如IL-2、IL-3誘導骨髓細胞合成胺、IL-6誘導肝細胞合成α1-抗糜蛋白酶等。通過測定所誘生的相應產物，可反映細胞因子的活性。

　　4.細胞病變抑制法：病毒可造成靶細胞的損傷，干擾素等則可抑制病毒所導致的細胞病變，因此可利用細胞病變抑制法檢測這類因子。

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