2022初級檢驗技師臨床檢驗基礎考點：血液細胞染色

2022初級檢驗技師臨床檢驗基礎考點：血液細胞染色

1.瑞氏染色法

瑞氏染色法是最經典、最常用染色法，尤其對于細胞質成分、中性顆粒等可獲得很好的染色效果，但對細胞核的著色能力略差。姬姆薩染液對細胞核、寄生蟲(如瘧原蟲等)著色較好，結構更清晰，但對細胞質成分的著色能力略差。采用瑞氏一姬姆薩復合染液可使細胞胞質、顆粒、胞核等均獲得滿意的染色效果。

瑞氏染料的質量規(guī)格用吸光度比值(rA)來評價，rA測定方法：取瑞氏染液15～25μl，加甲醇10ml稀釋，混勻，以甲醇為空白管，分別在波長650nm(美藍吸收峰波長)、525nm(伊紅吸收峰波長)測定吸光度(rA=A650/A525)。新配制染料rA接近2，隨美藍逐漸氧化為天青B(其吸收峰為650nm，吸光度約為美藍一半)，rA也下降，降到1.3±0.1時，染料即可使用。新鮮配制的染料偏堿，須在室溫或是37℃下貯存一定時間，待美藍逐漸變?yōu)樘烨郆，貯存時間愈久，染色效果愈好。在貯存過程中，必須加塞，以防甲醇揮發(fā)(如加甘油)和氧化成甲酸，所用甲醇須為AR級，若其中含過多丙酮，會使染色偏酸，白細胞著色不良。

2.吉姆薩染色法

吉姆薩染液由天青，伊紅組成。染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質，細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性，與堿性染料美藍或天青結合，染紫藍色，稱為嗜堿性物質，中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍均可結合，染淡紫色，稱為中性物質。

PH對細胞染色有一些影響。細胞里各種成分均不蛋白質，因為蛋白質系兩性電解質，帶電荷隨溶液PH而定，在偏酸性環(huán)境里下在電荷增多，易和伊紅結合，染色為偏紅，在偏三性環(huán)境里負電荷增多，易和美藍或天青結合，染色偏藍。所以細胞染色對氫離子濃度十分敏感，染色用正經片一定清潔，要無酸堿污染。配制頊特液一定用優(yōu)質甲醇，稀釋染色一定用緩沖液，沖洗一定用水應近中性，不然可導致各種細胞染色反應異常，以致于識別困難，甚至造成錯誤的。

一般性操作技術血涂片制備、細胞染色、顯微檢查、血液病診斷、染色不良。

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